
Die Hochdurchsatz-Sequenzierung von RNA ermöglicht es, komplette eukaryotische und prokaryotische Transkriptome auch ohne a priori Sequenzinformation zu analysieren. Durch Kombination unterschiedlicher Probenvorbereitungs- und Sequenzierprotokolle können verschiedene Fragestellungen gezielt untersucht und beantwortet werden, wie z.B. die Identifizierung von neuen und seltenen Transkripten, SNP-Detektion oder quantitative Expressionsanalysen. Machen Sie sich unsere langjährige Erfahrung und optimale Nutzung der modernsten Sequenziersysteme für Ihr wissenschaftliches Projekt zu Nutze.
= Roche GS FLX+ oder Pacific Biosciences PacBio RS | lange Reads für die de novo-Assemblierung und Analyse von full-length-Transkripten
+ optional: cDNA-Normalisierung zur Reduktion der Proben-Komplexität
+ projektspezifische Bioinformatik für jedes Budget: von den Rohdaten über die Assemblierung oder das Clustering bis hin zur Gen-Identifizierung mittels BLAST
= Illumina HiSeq 2000 | Single oder paired end-Sequenzierung für SNP-Detektion und quantitative Expressionsanalysen
+ optional: Präparation von 3’- oder 5’-UTR cDNA-Libraries zur spezifischen Analyse der informationsreichen untranslatierten Bereiche und Erhöhung der Sequenziertiefe
+ projektspezifische Bioinformatik für jedes Budget: von den Rohdaten über das Alignment bis hin zur SNP-Analyse und Expressionslevel-Bestimmung
Kombination verschiedener Probenvorbereitungsmethoden und Sequenzier-Technologien zur Identifizierung und Quantifizierung von Transkripten, für die keine vordefinierten kommerziellen Arrays zur Verfügung stehen
1. Poolen der poly(A)+ RNA von vier Proben und Präparation einer normalisierten cDNA-Library
2. Sequenzierung auf dem Roche GS FLX (Titanium)
3. Clustering der erhaltenen Sequenzdaten
4. Blasten der Cluster-Repräsentanten gegen bekannte EST-Datenbank zur Gen-Identifizierung
5. Präparation von vier nicht-normaliserten, unterschiedlich getaggten cDNA-Libraries
6. Sequenzierung der vier getaggten und gepoolten Libraries mit llumina-Technologie (36bp single read)
7. Mapping der Illumina Reads auf die GS FLX Sequenzdaten zur quantitativen Auswertung
(D) +49 - 7531 81 60 68
(F) +33 - 4 91 82 84 88
(GB) +44 - 207 691 4921
(S) +46 - 8 655 3609
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8-18 Uhr CET (Mo-Fr)
Genomics & Transcriptomes
Analyses & Visualisation
On the path to a deep understanding of the organism, two parameters are important to the interpretation of the Next Gen sequencing data: The use of various Next Gen systems to take advantage of each technology and the combination of different bioinformatic tools and their stepwise application.
Damit wir unsere Produkte und Services noch besser auf Sie ausrichten können, möchten wir gerne mehr über Sie in Ihrem Arbeitsumfeld erfahren. Dazu bitten wir Sie, folgende Fragen zu beantworten. Die Beantwortung dauert nur einen Augenblick. Selbstverständlich werden Ihre Antworten anonym behandelt. Vielen Dank für Ihre Unterstützung!
Ihr GATC-Team